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NIBSC 19/322 流感抗B標(biāo)準(zhǔn)品簡(jiǎn)介

發(fā)布時(shí)間: 2024-02-04  點(diǎn)擊次數(shù): 482次

NIBSC 19/322 流感抗B標(biāo)準(zhǔn)品用于 B/Phuket/3073/2013 樣抗原的單次徑向擴(kuò)散測(cè)定。使用 B/Phuket/3073/2013 病毒的純化 HA 在綿羊 743、744、745、746、747 和 748 中制備抗血清試劑。通過(guò)用菠蘿蛋白酶處理從純化的病毒中提取 HA 抗原并通過(guò)在蔗糖梯度上沉降來(lái)純化 (Brand, CN and Skehel, JJ, Nature, New Biology, 1972, 238, 145-147。


綿羊 743、744、745、746、747 和 748 的免疫計(jì)劃如下:肌肉內(nèi)注射一劑約 100 µg 的 B/Phuket/3073/2013 病毒 HA 和弗氏佐劑 (FCA),隨后兩周之后使用 20 微克劑量的弗氏不佐劑 (FIA)。每周給予三劑 10 微克的 HA,包括 FIA。初次免疫后六周,收集血清并加入NaN3(0.05% w/v)。然后通過(guò) APHIS 批準(zhǔn)的滅活 FMDV 方法處理抗血清。將從綿羊 743、744、745、746、747 和 748 獲得的抗血清混合,然后用含有NaN3 (0.05% w/v) 的 PBS 緩沖液按 1:2.8 稀釋,并裝入 2ml 體積的小瓶中。


NIBSC 19/322 流感抗B標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)于 1ml 中含有 20-50 微克 HA 活性的抗原的測(cè)定,應(yīng)將大約 15-25 µl 未稀釋的試劑添加到 1ml 瓊脂糖中。根據(jù)使用的 B/Phuket/3073/2013 抗原標(biāo)準(zhǔn)或根據(jù)當(dāng)?shù)貙?shí)驗(yàn)室條件,可能需要更改抗血清濃度。


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